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उत्पाद विवरण:
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| प्रोडक्ट का नाम: | डीएनए लिगेज | 10299ES40: | 40,000 यू |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400,000 यू | 10299ES83: | 1,600,000 यू |
| इनपुट डीएनए मोल (pmol): | इनपुट डीएनए (एनजी) / [0.66 × इनपुट डीएनए औसत लंबाई (बीपी)] | आवेदन पत्र: | अनुसंधान उपयोग के लिए ही! |
| हाई लाइट: | 400 U/UL T4 DNA Ligase,Research T4 DNA Ligase,T4 DNA Ligase बायोकेमिकल रिएजेंट |
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फास्ट T4 डीएनए लिगेज (400 U/µ l)
Fast T4 DNA Ligase एक एकल एंजाइम उत्पाद है जिसका उपयोग NGS पुस्तकालय निर्माण की प्रक्रिया में DNA टुकड़े और एडेप्टर को जोड़ने के लिए किया जा सकता है।उत्पाद को उच्च थ्रूपुट अनुक्रमण द्वारा सत्यापित किया गया है और इसमें उत्कृष्ट गुणवत्ता है।इस एंजाइम में अत्यधिक कुशल लिगेटिंग क्षमता होती है, जो कि जटिल न्यूक्लिक एसिड के टुकड़ों के लिगेटिंग के लिए बहुत उपयुक्त है, जैसे कि एमजीआई प्लेटफॉर्म का एडेप्टर।Hieff NGSTM अल्टिमा डीएनए लिगेज मॉड्यूल (कैट # 12604) का चयन करने की सिफारिश की जाती है, जिसका मुख्य घटक उन ग्राहकों के लिए फास्ट टी 4 डीएनए लिगेज है, जिन्हें सिस्टम समायोजन की आवश्यकता नहीं है।
| प्रोडक्ट का नाम | बिल्ली# | आकार |
| फास्ट टी4 डीएनए लिगेज (400 यू/µ एल) | 10299ES40 | 40,000 यू |
| 10299ES42 | 400,000 यू | |
| 10299ES83 |
1,600,000 यू |
उत्पाद विवरण के बारे मेंफास्ट T4 डीएनए लिगेज
Fast T4 DNA Ligase एक एकल एंजाइम उत्पाद है जिसका उपयोग NGS पुस्तकालय निर्माण की प्रक्रिया में DNA टुकड़े और एडेप्टर को जोड़ने के लिए किया जा सकता है।उत्पाद को उच्च थ्रूपुट अनुक्रमण द्वारा सत्यापित किया गया है और इसमें उत्कृष्ट गुणवत्ता है।इस एंजाइम में अत्यधिक कुशल लिगेटिंग क्षमता होती है, जो कि जटिल न्यूक्लिक एसिड के टुकड़ों के लिगेटिंग के लिए बहुत उपयुक्त है, जैसे कि एमजीआई प्लेटफॉर्म का एडेप्टर।Hieff NGS का चयन करने की अनुशंसा की जाती हैटीएमअल्टिमा डीएनए लिगेशन मॉड्यूल (कैट # 12604) जिसका मुख्य घटक उन ग्राहकों के लिए फास्ट टी 4 डीएनए लिगेज है, जिन्हें सिस्टम समायोजन की आवश्यकता नहीं है।
उत्पाद घटकके एसफास्ट T4 डीएनए लिगेज
| घटक संख्या | अवयव | बिल्ली#/आकार | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-ए | फास्ट टी4 डीएनए लिगेज (400 यू/µ एल) | 100 µ l | 1 एमएल | 4 एमएल |
| 10299-बी | 10 × T4 डीएनए लिगेज बफर | 250 μL | 5 × 500 μL | 10 एमएल |
निर्देश
1. वर्तमान मुख्यधारा के डीएनए पुस्तकालय निर्माण किट आम तौर पर अंत मरम्मत और ए-टेलिंग उपचार के बाद शुद्ध नहीं होते हैं, और सीधे एडेप्टर बंधाव करते हैं।कृपया प्रतिक्रिया प्रणाली के लिए निम्नलिखित तैयारी देखें।भंवर अच्छी तरह से, संक्षेप में स्पिन करें और 20 डिग्री सेल्सियस पर 15 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।
| अवयव | वॉल्यूम (μL) |
| डीए-टेल्ड डीएनए | 60 |
| 10 × T4 डीएनए लिगेज बफर | 10 |
| 50% खूंटी 6000 | 10* |
| डीएनए एडाप्टर | एक्स** |
| फास्ट टी4 डीएनए लिगेज (400 यू/µ एल) | 1-5*** |
| डीडीएच2हे | 100 तक |
[टिप्पणी]:*किट में 50% पीईजी 6000 उपलब्ध नहीं है, आपको इसे स्वयं तैयार करने की आवश्यकता है।
**एडाप्टर की मात्रा के लिए निम्न तालिका देखें।
***की राशितेज़इस्तेमाल किए गए T4 डीएनए लिगेज को आवश्यकतानुसार 1-5 μL जोड़ा जा सकता है।
2. उपयोग किए गए एडेप्टर की गुणवत्ता और एकाग्रता सीधे बंधाव दक्षता और पुस्तकालय उपज को प्रभावित करती है।बहुत अधिक एडॉप्टर उपयोग अधिक एडेप्टर डिमर उत्पन्न कर सकता है, जबकि कम उपयोग लिगेशन दक्षता और लाइब्रेरी यील्ड को प्रभावित कर सकता है।निम्न तालिका इस किट का उपयोग करके विभिन्न इनपुट डीएनए स्थितियों में उपयोग किए जाने वाले एडेप्टर की अनुशंसित मात्रा को सूचीबद्ध करती है।
| इनपुट डीएनए |
एडेप्टर: इनपुट डीएनए (दाढ़ अनुपात) |
इनपुट डीएनए |
एडेप्टर: इनपुट डीएनए (दाढ़ अनुपात) |
| 1 माइक्रोग्राम | 10:1 | 50 एनजी | 100:1 |
| 500 एनजी | 20:1 | 25 एनजी | 200:1 |
| 250 एनजी | 40:1 | 1 एनजी | 200:1 |
| 100 एनजी | 100:1 | 500 पीजी | 400:1 |
[नोट]: इनपुट डीएनए मोल (पीएमओएल)≈ इनपुट डीएनए (एनजी)/ [0.66 × इनपुट डीएनए औसत लंबाई (बीपी)]।
स्टेप 1: इनपुट डीएनए के मोल्स की संख्या की गणना करें।सूत्र: इनपुट डीएनए मोल (pmol)≈ इनपुट डीएनए (एनजी)/ [0.66 × इनपुट डीएनए औसत लंबाई (बीपी)];इनपुट डीएनए मोल (pmol)=100 (0.66×300) = 0.5 pmol;
चरण दो: उपरोक्त तालिका के अनुसार, जोड़े गए एडेप्टर के मोल्स की संख्या की गणना करें।;जब इनपुट डीएनए 100ng होता है, एडेप्टर का मोलर अनुपात: इनपुट डीएनए 100:1 है, और एडेप्टर के मोल्स की संख्या = 100 × 0.5 pmol = 50 pmol;
चरण 3: एडेप्टर जोड़ मात्रा की गणना करें।एडेप्टर एकाग्रता = 15 μmol/L (यदि आप अन्य कंपनी के एडेप्टर का उपयोग करते हैं, तो आपको इसके निर्देशों के अनुसार इसकी एकाग्रता निर्धारित करने की आवश्यकता है);एडॉप्टर का आयतन = जोड़ा गया एडेप्टर का मोल (50 pmol) ÷ एडेप्टर की सांद्रता (15 μmol/L) = 3.34 μL (नोट: 15 μmol/L = 15 pmol/ μL);
सारांश, जिस मात्रा में एडेप्टर जोड़ा जा सकता है वह 3.4 μL है।(नोट: एडॉप्टर की अधिकतम जोड़ मात्रा 5 μL से अधिक नहीं है)।
इकाई परिभाषा
20 μL बंधाव प्रतिक्रिया प्रणाली में, जब 6 μg DNA-Hind को 16 ℃ पर 30 मिनट के लिए प्रतिक्रिया दी जाती है, तो डीएनए अंशों के 50% से अधिक बंधन देने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा को एक इकाई (U) के रूप में परिभाषित किया गया था।
चेतावनी
1. T4 डीएनए लिगेज भौतिक विकृतीकरण के प्रति संवेदनशील है।मिलाते समय, ट्यूब को धीरे से पलटें और अच्छी तरह हिलाएं।जोर से मत हिलाओ;
2. एंजाइमों को एक आइस बॉक्स में या एक आइस बाथ में संग्रहित किया जाना चाहिए, और उपयोग के तुरंत बाद -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जाना चाहिए;
3.यह प्रॉडक्ट केवल शोध के उपयोग के लिए है!
4.अपनी सुरक्षा और स्वास्थ्य के लिए, कृपया ऑपरेशन के लिए लैब कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनें।
यदि आपको इस Fast T4 DNA ligase (400 U/µL) के बारे में अधिक जानकारी चाहिए, तो कृपया हमसे संपर्क करें, धन्यवाद
व्यक्ति से संपर्क करें: Ms Kris
दूरभाष: +8613049739311
