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उत्पाद विवरण:
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| उत्पादों: | बीएसएआई | इंजीनियर प्रतिबंध एंजाइम: | 5-15 मिनट में तेजी से डीएनए पाचन |
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| कटिंग साइट: | 3'-सीसीएजीएजी(एन)5↑-5' | सेते: | 37 ℃। |
| थर्मल निष्क्रियता: | 80 ℃ 20 मिनट के लिए | अनुशंसित प्रतिक्रिया शर्तें: | 1× FuniCut™ Buffer; 1× FuniCut™ बफ़र; Incubate at 37℃. 37 ℃ पर सेते हैं। |
| हाई लाइट: | डीएनए पाचन 15 मिनट एंजाइम बीएसएआई,रैपिड डीएनए पाचन एंजाइम बीएसएआई,एंजाइम बीएसएआई जैव रासायनिक अभिकर्मक |
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एंजाइम BsaI
एंजाइम 5-15 मिनट में तेजी से डीएनए पाचन के लिए इंजीनियर प्रतिबंध एंजाइमों की एक श्रृंखला है।एंजाइमों का उपयोग प्लास्मिड, जीनोमिक और वायरल डीएनए के साथ-साथ पीसीआर उत्पादों को पचाने के लिए किया जा सकता है।सभी एंजाइम सार्वभौमिक बफर में बेहतर गतिविधि दिखाते हैं, इसलिए एंजाइमेटिक पाचन प्रतिक्रिया प्रणाली को सरल बनाते हैं।इसके अलावा, एंजाइम उत्कृष्ट एंजाइम अतिरेक प्रदान करते हैं, जिससे सब्सट्रेट अतिरिक्त या कठिन टेम्पलेट्स के आसान पाचन की अनुमति मिलती है।
शिपिंग और भंडारण
घटकों को आइस पैक के साथ भेज दिया जाता है और 2 साल के लिए -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है।
कटिंग साइट
5'-जीजीटीसीटीसी (एन)1↓-3'
3'-सीसीएजीएजी(एन)5↑-5'
अनुशंसित प्रतिक्रिया शर्तें
1× FuniCut™ बफ़र;37 ℃ पर सेते हैं।
थर्मल निष्क्रियता
20 मिनट के लिए 80 ℃ पर ऊष्मायन।
गुणवत्ता नियंत्रण
1. गतिविधि परिभाषा:1 μg pPIC9K डीएनए पूरी तरह से एंजाइम के 1 μL के साथ 15 मिनट में 37 ℃ पर 20 μL की कुल प्रतिक्रिया मात्रा में पच गया था।
2. लंबे समय तक ऊष्मायन / स्टार गतिविधि परख:1 μg pPIC9K डीएनए का कोई पता लगाने योग्य क्षरण नहीं न्यूक्लियस संदूषण या स्टार गतिविधि के कारण 1 μL FuniCut ™ BsaI के साथ 37 ℃ पर 3 घंटे के लिए ऊष्मायन के दौरान हुआ।लंबे समय तक ऊष्मायन के परिणामस्वरूप स्टार गतिविधि हो सकती है।
3. बंधन और पुनर्विक्रय (एल / आर) परख:इष्टतम स्थिति के तहत 1μL एंजाइम के साथ पचने के बाद, पाचन से रीसायकल उत्पाद को 22 ℃ पर T4 डीएनए लिगेज के तहत लिगेट किया जा सकता है।बंधाव उत्पाद को एंजाइम द्वारा पुनः विखंडित किया जा सकता है।
4. निरर्थक एंडोन्यूक्लिज गतिविधि:37 डिग्री सेल्सियस पर 4 घंटे के लिए 1 माइक्रोग्राम सुपरकोल्ड प्लास्मिड डीएनए के साथ 1 μL एंजाइम के ऊष्मायन के परिणामस्वरूप सुपरकोल्ड स्थिति में कोई बदलाव नहीं हुआ।
निर्देश
1. विभिन्न डीएनए के तेजी से पाचन के लिए प्रोटोकॉल
1.1 बर्फ पर निम्नलिखित प्रतिक्रिया घटकों को संकेतित क्रम में मिलाएं:
| अवयव | प्लास्मिड डीएनए | पीसीआर उत्पाद | जीनोमिक डीएनए |
| डीडीएच2हे | 15 μL | 16 μL | 30 μL |
| 10×FuniCut™ बफ़र या 10×FuniCut™ रंग बफ़र | 2 μL | 3 μL* | 5 μL |
| डीएनए | 2 μL (1 माइक्रोग्राम तक) | 10 μL (लगभग 0.2 μg) | 10 μL (5 माइक्रोग्राम) |
| FuniCut™ बीएसएआई | 1 μL | 1 μL | 5 μL |
| कुल | 20 μL | 30 μL | 50 μL |
[नोट]: *शुद्ध पीसीआर उत्पादों के लिए।10× . की मात्राFuniCut™ बफ़रअशुद्ध पीसीआर उत्पादों में शेष आयनिक शक्ति के कारण 2 μL तक कम किया जा सकता है।पीसीआर उत्पाद को पाचन से पहले शुद्ध करने की सिफारिश की गई थी जब क्लोनिंग के लिए पीसीआर उत्पाद का उपयोग किया जाएगा।
1.2 धीरे से मिलाएं (भंवर न करें) और नीचे स्पिन करें।
1.3 37 ℃ पर 15 मिनट (प्लाज्मिड डीएनए) या 15-30 मिनट (पीसीआर उत्पाद) के लिए या 30-60 मिनट (जीनोमिक डीएनए) के लिए इनक्यूबेट करें।
1.4 वैकल्पिक: 80 ℃ पर 20 मिनट के लिए गर्म करके एंजाइम को निष्क्रिय करें।
2. डीएनए का दोहरा और एकाधिक पाचन
2.1 प्रत्येक एंजाइम के 1 μL का उपयोग करें और प्रतिक्रिया की स्थिति को उचित रूप से बढ़ाएँ।
2.2 प्रतिक्रिया मिश्रण में एंजाइमों की संयुक्त मात्रा कुल प्रतिक्रिया मात्रा के 1/10 से अधिक नहीं होनी चाहिए।
2.3 यदि एंजाइमों को अलग-अलग प्रतिक्रिया तापमान की आवश्यकता होती है, तो उस एंजाइम से शुरू करें जिसके लिए कम तापमान की आवश्यकता होती है, फिर दूसरा एंजाइम जोड़ें और उच्च तापमान पर इनक्यूबेट करें।
3. प्लास्मिड डीएनए पाचन प्रतिक्रिया को बढ़ाना
| अवयव | वॉल्यूम (20 μL) | वॉल्यूम (20 μL) | वॉल्यूम (50 μL) |
| डीएनए | 1 माइक्रोग्राम | 2 माइक्रोग्राम | 5 माइक्रोग्राम |
| FuniCut™ XbaI | 1 μL | 2 μL | 5 μL |
| 10× FuniCut™ Bufferor10× FuniCut™ कलर बफर | 2 μL | 2 μL | 5 μL |
| कुल | 20 μL | 20 μL | 50 μL |
[टिप्पणी]: पानी थर्मोस्टेट, धातु थर्मोस्टेट या रेत थर्मोस्टेट में ऊष्मायन।ऊष्मायन समय बढ़ाएँ यदि कुल प्रतिक्रिया मात्रा 20 μL से अधिक हो।
डीएनए में मान्यता साइटों की संख्या
| डीएनए | X174 | पीबीआर 322 | पीयूसी57 | पीयूसी18/19 | एसवी40 | M13mp18/19 | एडीनो2 |
| 2 | 0 | 1 | 1 | 1 | 0 | 0 | 1 |
पाचन पर मिथाइलेशन प्रभाव
| बाँध | डीसीएम | सीपीजी | इकोकि | इकोबीआई |
| कोई प्रभाव नहीं | ओवरलैप होने पर ब्लॉक किया गया | ओवरलैप होने पर ब्लॉक किया गया | कोई प्रभाव नहीं | ओवरलैप होने पर ब्लॉक किया गया |
विभिन्न बफ़र्स में गतिविधि
| FuniCut™ बफ़र |
थर्मो वैज्ञानिक फास्टडाइजेस्ट बफर |
चंचु कटस्मार्ट®बफर |
तकरा QuickCut™ बफ़र |
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| गतिविधि | 100% | 100% | 100% | 100% |
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व्यक्ति से संपर्क करें: Ms Kris
दूरभाष: +8613049739311
